Som leverantör av Bacillus subtilis har jag ofta blivit frågad om de mest lämpliga kulturmedierna för att odla denna anmärkningsvärda bakterie. Bacillus subtilis är ett gram -positivt, stavformad bakterie känd för sitt breda utbud av tillämpningar, från industriell enzymproduktion till jordbruksbruk som biokontrollmedel. I den här bloggen kommer jag att fördjupa de olika kulturmedierna som är väl lämpade för tillväxten av Bacillus subtilis.
Näringsämne - Rika allmänna medier
Ett av de mest använda medierna för att odla Bacillus subtilis är näringsagar (NA) och näringsbuljong (NB). Näringsagar är ett fast medium, medan näringsbuljong är en flytande. Dessa media består av grundläggande näringsämnen som pepton, nötköttextrakt och natriumklorid. Pepton tillhandahåller en källa till kväve i form av aminosyror och peptider, som är viktiga för syntesen av bakteriella proteiner. Nötköttextrakt innehåller vitaminer, kolhydrater och annan tillväxt - främjande faktorer. Natriumklorid hjälper till att upprätthålla den osmotiska balansen i mediet.
Bacillus subtilis växer bra på näringsagar och bildar kolonier som vanligtvis är stora, platta och oregelbundna form. På näringsbuljong orsakar den turbiditet när den multipliceras. Enkelhet och kostnad - effektiviteten för dessa media gör dem till ett populärt val i laboratorier för rutinmässig odling av Bacillus subtilis.
Syntetisk media
Syntetiska medier formuleras med kemiskt definierade komponenter. De är användbara när forskare exakt måste kontrollera de näringsämnen som finns tillgängliga för bakterierna. För Bacillus subtilis kan ett syntetiskt medium innehålla oorganiska salter som kaliumfosfat, magnesiumsulfat och ammoniumsulfat, tillsammans med en kolkälla såsom glukos.
Fördelen med syntetiska medier är att de möjliggör studier av de specifika näringskraven i Bacillus subtilis. Till exempel, genom att variera koncentrationen av ett visst näringsämne, kan forskare bestämma hur det påverkar tillväxttakt, sporulering eller metabolitproduktion av bakterien. Emellertid kan beredningen av syntetiska medier vara mer tid - konsumtion och dyra jämfört med allmänna medier.
Selektiv media
I vissa fall är det nödvändigt att isolera Bacillus subtilis från en blandad kultur. Selektiva media är utformade för att hämma tillväxten av andra mikroorganismer samtidigt som Bacillus subtilis tillåter. Ett sådant selektivt medium är Mannitol Salt Agar (MSA). Även om MSA ofta används för isolering av Staphylococcus -arter, kan den också användas för att välja Bacillus subtilis till viss del.
MSA innehåller en hög koncentration av salt (7,5% natriumklorid), vilket hämmar tillväxten av många icke -halotoleranta bakterier. Mannitol är kolhydratkällan i mediet, och Bacillus subtilis kan jässa mannitol, vilket ger syra som orsakar en förändring i färgen på pH -indikatorn i mediet. Den här egenskapen kan användas för att differentiera Bacillus subtilis från andra bakterier som kan finnas i provet.
Berikad media
Anrikade medier används för att främja tillväxten av snygga bakterier eller för att förbättra tillväxten av en viss mikroorganism. För Bacillus subtilis kan blodagar användas som ett anrikat medium. Blodagar innehåller ett basmedium (vanligtvis näringsagar) kompletterat med 5 - 10% får eller hästblod.
Blodet ger ytterligare näringsämnen som hemin och tillväxtfaktorer som kan stimulera tillväxten av Bacillus subtilis. Vissa stammar av Bacillus subtilis kan visa beta -hemolys på blodagar, som är den fullständiga lyseringen av röda blodkroppar, vilket resulterar i en klar zon runt kolonierna. Denna hemolytiska aktivitet kan vara en viktig egenskap för identifiering av vissa stammar.
Media för industriproduktion
I en industriell miljö drivs ofta valet av kulturmedia för Bacillus subtilis av kostnader, skalbarhet och den önskade slutprodukten. För produktion av enzymer, såsom proteaser och amylaser, föredras media som innehåller billiga kol- och kvävekällor. Till exempel kan majs brant sprit, en by - produkt av majs - våt - fräsningsprocessen, användas som kvävekälla. Den är rik på aminosyror, peptider och vitaminer.
Stärkelse kan användas som kolkälla, särskilt när man producerar amylaser. Användningen av dessa industriella medier minskar inte bara produktionskostnaden utan möjliggör också storskalig odling av Bacillus subtilis.
Specialiserade media för sporulering
Bacillus subtilis har förmågan att bilda sporer under vissa förhållanden. Sporer är mycket resistenta mot miljöspänningar och är viktiga för bakteriens långsiktiga överlevnad. För att inducera sporulering kan media som Schaeffer - Fulton Medium användas.
Detta medium innehåller komponenter som utlöser sporuleringsprocessen, såsom kalciumjoner och specifika aminosyror. Bildningen av sporer kan visualiseras med användning av färgningstekniker, såsom Schaeffer - Fulton Spore -fläcken, som skiljer mellan vegetativa celler och sporer.
Jämför med relaterade bacillusarter
Det är intressant att notera skillnaderna i kulturmediekraven i Bacillus subtilis jämfört med relaterade arter somBacillus megaterium,Bacillus licheniformis (jordbruk)ochBacillus mucilaginosus krassilnikov. Även om många av de allmänna medierna som näringsagar och näringsbuljong kan stödja tillväxten av dessa Bacillus -arter, kan var och en ha unika näringspreferenser.
Till exempel kan Bacillus megaterium kräva en något högre koncentration av vissa aminosyror för optimal tillväxt, medan Bacillus licheniformis kan vara mer effektiva för att använda komplexa kolhydrater. Att förstå dessa skillnader kan hjälpa till vid selektiv odling och identifiering av dessa arter i ett blandat prov.
Slutsats
Sammanfattningsvis beror valet av kulturmedia för Bacillus subtilis på syftet med odlingen. Oavsett om det är för rutinmässigt laboratoriearbete, forskning om dess fysiologiska egenskaper, industriell produktion av enzymer eller isolering från en blandad kultur finns det olika medier tillgängliga. Varje typ av media har sina egna fördelar och nackdelar, och genom att noggrant välja lämpligt medium kan man säkerställa en framgångsrik odling av Bacillus subtilis.
Om du är intresserad av att köpa Bacillus Subtilis av hög kvalitet för din forskning, industriella eller jordbruksbehov, är vi här för att hjälpa dig. Vi har ett brett utbud av Bacillus subtilis -stammar som är väl - karakteriserade och lämpliga för olika applikationer. Kontakta oss för mer information och för att starta en upphandlingsförhandling.
Referenser
- Madigan, MT, Martinko, JM, Bender, KS, Buckley, DH, & Stahl, DA (2018). Brock Biology of Microorganisms. Pearson.
- Pelczar, MJ, Chan, ECS, & Krieg, NR (1993). Mikrobiologi: koncept och tillämpningar. McGraw - Hill.
- Atlas, RM (2010). Handbok för mikrobiologiska medier. CRC Press.